Anti-GAPDH抗體（兔單抗）
Anti-GAPDH Antibody（Monoclonal Antibody from Rabbit）
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產(chǎn)品編號(hào)
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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RGA1150
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Anti-GAPDH抗體（兔單抗）
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20 μl
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● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
甘油醛-3- 磷酸脫氫酶（
Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase，GAPDH） 是糖酵解（glycolysis）過(guò)程中的關(guān)鍵酶，分子量為37 kD左右。它催化甘油醛-3-磷酸的氧化磷酸化反應(yīng)。
GAPDH 作為管家基因在同種細(xì)胞或者組織中一般是恒定、高水平表達(dá)的，常用作Western Blot
實(shí)驗(yàn)的內(nèi)參照。
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來(lái)源
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用途及稀釋比例
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抗體類型
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GAPDH分子量
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Rabbit
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WB 1:3000-5000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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單克隆抗體
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36-38 kD
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注：WB, Western blot; IHC, Immunohistochemistry;
IF, Immunofluorescence
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測(cè)，稀釋5000倍，一次使用5 ml稀釋的抗體，至少可以檢測(cè)20次。
● 貯存形式：
穩(wěn)定溶液，1 mg/ml 抗體溶于PBS，50%甘油，pH7.2。
● 保存及運(yùn)輸條件：
-20℃保存，一年有效；避免反復(fù)凍融；濕冰運(yùn)輸。
● 使用說(shuō)明：
1. Western Blot雜交(ECL顯色)：1:3000-5000稀釋，常溫孵育1-2 h或4℃過(guò)夜。
2. 免疫熒光（IF）和免疫組化（IHC）：1:200-1000稀釋。
● 實(shí)驗(yàn)示例：
實(shí)驗(yàn)程序 Jurkat 無(wú)去垢劑提取TP，GAPDH檢測(cè)（pI~8.6）：
凝膠：RTD6139-0416 BN預(yù)制膠
電泳：1×藍(lán)色電泳緩沖液（含0.002% G-250）
穩(wěn)壓150V 45分鐘；1×無(wú)色電泳緩沖液 穩(wěn)壓150V 46分鐘
膠浸泡：1×BN轉(zhuǎn)膜緩沖液（含20%甲醇）+0.1%SDS浸泡10分鐘
轉(zhuǎn)膜：1×BN轉(zhuǎn)膜緩沖液（含20%甲醇），穩(wěn)流200 mA
（電壓89-81V） 1.5小時(shí)，未冰浴
膜漂洗去藍(lán)色：PVDF膜無(wú)水甲醇浸泡10分鐘至膜無(wú)色
封閉：無(wú)蛋白快速封閉，RT，30分鐘
一抗：GAPDH抗體，1：5000 RT 一小時(shí)
二抗：羊抗兔IgG-HRP 1：5000 RT 1.5小時(shí)
ECL：ECL發(fā)光，機(jī)器拍照，曝光2min