RealCarrier核酸助沉劑
RealCarrier Nucleic Acid Precipitation Solution
● 產(chǎn)品貨號(hào)及規(guī)格：
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產(chǎn)品編號(hào)
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產(chǎn)品名稱
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包裝
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貯存
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RTP3101-01
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RealCarrier核酸助沉劑
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2×1ml
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4℃
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NA1050-03
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3M NaAc pH5.2
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5 ml
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RT
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說明書
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一份
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● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
RealCarrier核酸助沉劑是幫助核酸在乙醇中沉淀的一種非動(dòng)物源性的核酸沉淀專用試劑。乙醇低溫沉淀是回收液體樣品中DNA和RNA的最常用方法。然而乙醇沉淀并不能完全回收樣品中的核酸，特別是在回收微量(＜5ng/μl)或者低片段(＜200bp)核酸時(shí)，損失更為嚴(yán)重(有數(shù)據(jù)表明，單獨(dú)的乙醇沉淀只能回收50%的此類DNA和RNA)。RealCarrier核酸助沉劑是一種分子生物學(xué)級(jí)的非動(dòng)物源性的多聚物溶液，在乙醇沉淀時(shí)加入4-6 μl RealCarrier核酸助沉劑即可明顯提高核酸沉淀的得率，可使痕量DNA(＜5ng/μl)的回收率達(dá)到95-98%，同時(shí)可選擇性去除短引物(<20bp)片段和dNTP。與生物源性的核酸沉淀助劑如糖原（有文獻(xiàn)報(bào)道，糖原影響DNA-蛋白質(zhì)的相互作用）和tRNA相比（tRNA會(huì)影響多聚核苷酸激酶對(duì)DNA的磷酸化），RealCarrier核酸助沉劑本身無核酸污染也無DNA酶和RNA酶活性，同時(shí)不影響酶切、連接、轉(zhuǎn)錄、PCR、轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)染等。RealCarrier核酸助沉劑已成為最常用的核酸助沉劑。
按照400 μl核酸樣品使用5 μl RealCarrier核酸助沉劑計(jì)算，該產(chǎn)品可以至少使用400次。
● 貯存：
4℃貯存。有效期二年。
● 使用說明：
1. 按照下表，在1.5ml離心管中依次加入DNA樣品，0.1倍樣品體積3MNaAc pH5.2，5μl RealCarrier，2.5倍樣品體積無水乙醇，混合均勻；當(dāng)樣品體積大于400
μl時(shí)，可按每100 μl加入1μl RealCarrier的比例增加使用量，如700μl樣品，加8μl RealCarrier。
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不同體積的DNA樣品處理
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DNA樣品
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100 μl
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200 μl
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300 μl
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400μl
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3M NaAC pH5.2
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10 μl
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20 μl
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30 μl
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40 μl
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RealCarrier
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5 μl
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5μl
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5μl
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5μl
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無水乙醇
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250 μl
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500 μl
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750 μl
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1000 μl
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注：a 待回收的核酸樣品濃度要在10 pg/μl至100 ng/μl之間。過高濃度的樣品使用本產(chǎn)品會(huì)降低回收效率，高于300 ng/μl的樣品不要使用本產(chǎn)品，可以直接使用經(jīng)典的乙醇沉淀方法回收。
b 加入RealCarrier核酸助沉劑后無需低溫孵育，低溫孵育反而會(huì)降低回收效率?；靹蚝笳?qǐng)直
接進(jìn)行離心步驟。
2.
12000rpm 常溫離心10分鐘。
3. 棄上清，加入1ml 70%乙醇漂洗沉淀；12000rpm
常溫離心5分鐘。
4. 棄上清，快甩離心，用10 μl微量移液器徹底吸棄殘余乙醇，常溫開蓋干燥1-2分鐘干燥沉淀。
注：干燥時(shí)間不要過久，過分干燥的核酸樣品不易溶解；干燥時(shí)間也不能過短，殘余的乙醇會(huì)影響核酸樣品的后續(xù)操作，如抑制內(nèi)切酶的活性。
5 沉淀溶解于1×TE或超純水中，-20℃保存。